TELEFON

+86 (027) 5111 3188

CALCINE AM-ZELLENVERFAHRENDEKAR (CCK-F)

Anteil an:

Volumen: 1.00t.

Verfügbarkeitsstatus:
  • G1609-100T.
  • Servicebio

Produktbeschreibung

Produktinformation

Produktname

Katze. Nein.

Spec.

CALCINE AM-ZELLENVERFAHRENDEKAR (CCK-F)

G1609-100T.

100t Jahre

G1609-500T.

500t.

Calcein AM basiert auf Calcein (Calcein), der eine Acetomethoxymethyl (AM) -Gruppe einführt. Die AM-Gruppe massiert nicht nur den molekularen Teil des Calcein-Chelating-Calciums, sondern verbessert auch seine Hydrophobizität, sodass Calcein AM nicht leicht in die Membran von lebenden Zellen eindringen kann und durch die endogene Esterase der Zelle in Calcein gespalten wird. Calcein, der die AM-Gruppe verloren hat, kann nicht leicht durch die Zellmembran gehen und somit in der Zelle zurückgehalten werden; Außerdem ist der Teil des Calciumchelating-Moleküls freigelegt, sodass die Calcein-Sonde in lebenden Zellen an Calciumionen bindet und starke grüne Fluoreszenz emittiert. Der Mangel an Esterase in toten Zellen lässt nicht zu, dass Calcein in Calcein hydrolysiert wird, so dass tote Zellen nicht gekennzeichnet werden können. Calcein AM hat eine geringe Zytotoxizität und hat wenig Effekt auf Zellfunktionen, wie z. B. Zellproliferation oder Lymphozyten-Chemotaxie. Es ist eine fluoreszierende Sonde, die sehr geeignet ist, um live Zellen zu färben.

Dieses Produkt-Calcein-AM-Zell-Reinigungskennsatz wird auch als Zellfluoreszenzzählkit (CCK-F) bezeichnet, der Calcein am Fluoreszenzsonde verwendet, um Live-Zellen zu kennzeichnen, um die Rentabilität der Zelle, der Toxizität und der Proliferation zu bewerten. Erkennungskit. Nach Optimierung und Debugging hat dieses Kit nicht nur eine hohe Erkennungsempfindlichkeit und einen weiten linearen Bereich, sondern erfordert auch nur eine kurze Inkubation, um die Erfassung von Zellen abzuschließen. Die Operation ist einfach, erfordert keine Radioisotop-Kennzeichnung und erfordert keine Schritte wie die Kristallauflösung, die Fehler durch experimentelle Vorgänge reduzieren und die Genauigkeit und Wiederholgenauigkeit verbessern können.

Lagerung und Transport

Transport von Eisbeutel (Nasseis);

Bei -20 ° C lagern. CALCINE AM-Lösung sollte im Dunkeln aufbewahrt werden, und wiederholtes Einfrieren und Auftauen sollte so viel wie möglich vermieden werden. Es gilt für 12 Monate.

Produktliste:

Katze. Nein.

Produktbeschreibung

Volumen

G5051-100ML.

Dimethylsulfoxid DMSO biochemischer Qualität

100ml

Lagerung und Transport

Lagerung und Transport bei Raumtemperatur, gültig für 2 Jahre.

Komponente

Komponentennummer

Komponente

G1609-100T.

G1609-500T.

G1609-1.

Calcein bin lösung.

10 μl.

50 μl.

G1609-2.

CCK-FD-Erkennungspuffer

10 ml.

50 ml.

Handbuch

1

Betriebsschritte:

1. Vorbereitung der Calcein-AM-Erkennungs-Arbeitslösung:

Gemäß der Nutzungsnutzung von 100 μl pro Vertiefung der 96-Well-Platte siehe die folgende Tabelle, mischen Sie Calcein AM-Lösung und CCK-F-Erkennungspuffer im Verhältnis zur Erstellung von Calcein-AM-Erkennungs-Arbeitslösung.

Komponente

10PCs-Proben

50PCs-Proben

100PCs-Proben

Calcein bin lösung.

1 μl.

5 μl.

10 μl.

CCK-F-Erkennungspuffer

1 ml

5 ml.

10 ml.

2. Anhaftende Zellerkennung:

Die folgenden Schritte entsprechen im Wesentlichen dem 96-Well-Plattenerfassungsschema, und andere Wellplattensysteme müssen entsprechend der Situation eingestellt werden.

A. Zellautscheibenplatte: Gleichmäßig säen die Zellen in einer 96-Well-Platte mit einer bestimmten Dichte, und tragen Sie Medikamente oder andere Vorbehandlungen an (die Sämaschine wird durch Faktoren wie Zellengröße, Wachstumsrate usw. bestimmt);

B. (Optional) Zellenwaschen: Aspirieren Sie das Originalkulturmedium und waschen Sie 1-2 Mal mit PBS-Puffer (G4202 empfohlen), um die Interferenz von Serum, Phenolrot oder Drogen auf den experimentellen Ergebnissen zu reduzieren;

C. Sondenkennzeichnung: Fügen Sie nach dem Entfernen des Zellkulturmediums oder des PBS-Puffers 100 μl CALCEIN AM-Erkennungs-Arbeitslösung hinzu, und inkubieren Sie 30 min bei 37 ° C in der Dunkelheit;

A. (Optional) Zelleninkubation: Ändern Sie das Zellkulturmedium und inkubieren Sie weiterhin 15-30 Minuten, um sicherzustellen, dass das Calcein AM in den Zellen vollständig hydrolysiert ist;

B. Fluoreszenzerkennung: Verwenden Sie einen Mikroplattenleser für den Fluoreszenzablesung, die maximale Anregungswellenlänge der Calcein-AM-Sonde beträgt 501 nm, und die maximale Emissionswellenlänge beträgt 521 nm. Die Zellaktivität ist direkt proportional zur Fluoreszenzintensität. Gemäß verschiedenen experimentellen Zwecken können Zellkerne weiter von anderen Instrumenten (wie Fluoreszenzmikroskop) zugeldert oder nachgewiesen werden.

1. Aufhängungszellenerkennung:

A. Zellsamen: Gleichmäßige Samenzellen in einer 24-Well-Platte mit einer bestimmten Dichte und Tragen Sie Medikamente oder andere Vorbehandlungen an (die Sämaschine wird durch Faktoren wie Zellengröße, Wachstumsgeschwindigkeit usw. bestimmt);

B. (Optional) Zellenwaschen: Zentrifugierung bei 1000 g für 3-5 Minuten, um das Originalmedium zu entfernen und 1-2 Mal mit PBS-Puffer zu waschen, wenn Sie eine 1000-g-Zentrifugation für 3-5 Minuten benötigen, um Serum, Phenolrot zu reduzieren Drogenstörungen mit experimentellen Ergebnissen;

C. Sondenkennzeichnung: Entfernen Sie nach einer Zentrifugation bei 1000 g für 3-5 min das Zellkulturmedium oder PBS-Puffer, fügen Sie eine geeignete Menge an Calcein-AM-Erkennungs-Arbeitslösung hinzu, und inkubieren Sie 30 Minuten bei 37 ° C im Dunkeln;

D. (Optional) Zelleninkubation: Ändern Sie das Zellkulturmedium und inkubieren Sie 15-30 Minuten, um sicherzustellen, dass das Calcein AM in den Zellen vollständig hydrolysiert ist;

e. Fluoreszenzerkennung: Verwenden Sie einen Mikroplattenleser oder einen Durchflusszytometer für die Fluoreszenzerfassung. Die maximale Anregungswellenlänge von CALCINE AM-Sonde beträgt 501 nm, und die maximale Emissionswellenlänge beträgt 521 nm. Die Zellaktivität ist direkt proportional zur Fluoreszenzintensität. Gemäß verschiedenen experimentellen Zwecken können Zellkerne weiter mit anderen Instrumenten (wie dem Fluoreszenzmikroskop) reduziert oder nachgewiesen werden.

Anmerkungen:

1. CALCINE AM-Lösung wird vor dem Gebrauch für kurze Zeit zentrifugiert, um den Reagenzverlust zu senken.

2. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen von Calcein AM-Lösung. Nach Erhalt des Produkts wird empfohlen, es in geeigneter Weise aliquotieren und in einem versiegelten Behälter bei -20 ° C im Dunkeln zu speichern.

3. Calcein Am ist in wässriger Lösung instabil. Die CALCINE AM Detection-Arbeitslösung muss auf den sofortigen Gebrauch erstellt werden, und es ist innerhalb von 24 Stunden wirksam.

4. Aufgrund unterschiedlicher Zellzustände kann die Inkubationszeit und die Konzentration der Calcein AM-Erkennungs-Arbeitslösung entsprechend der Situation eingestellt werden.

5. Wenn Sie einen Mikroplattenleser verwenden, um die Fluoreszenzintensität zu messen, verwenden Sie bitte eine schwarze Zellkulturplatte.

6. Fluoreszenzfarbstoffe haben löschende Probleme. Bitte arbeiten Sie und lagern Sie sie vom Licht weg.

7. Tragen Sie für Ihre Gesundheit und Sicherheit Labormäntel und Handschuhe während des Betriebs.

Dieses Produkt ist nur für wissenschaftliche Forschungszwecke, nicht für die klinische Diagnose!

downloadimg.Scheibe 13.Scheibe 12.Scheibe 10Scheibe 14.

Contact us

Schnelle Links

Produktkategorie

In Kontakt kommen

 5. Stock, 22 Gebäude, Biopark, Gaoxin 2. Straße Nr. 388, East Lake High-Tech Entwicklungszone, Wuhan, Hubei, China 430079
 +86 (027) 5111 3188
Copyright © 2021 Wuhan ServiceBio Technology Co., Ltd.