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Anteil an:

G2002-100ml 100ml starker Ripa-Lyse-Puffer für Zelle

Spezialisierung:100ml
Verwendungszweck:Schnelle Lyse von Zellen und Geweben.
Transport und Lagerung:Nasser Eisbeuteltransport; Laden Sie mit 4 einund halten Sie sich vom Licht fern, gültig für 18 Monate.
Ml:
Verfügbarkeitsstatus:
  • G2002-100ML.
  • Servicebio

Produktbeschreibung

Überblick

RIPA LYSE-Puffer (RIPE LYSE-Puffer) ist eine traditionelle schnelle Lyse-Lösung für Zellen und Gewebe. Protein-Proben, die aus Gewebe und Zellen erhalten wurden, die von RIPA Lysat abgespalten werden, können für die Routinerseite, Western, Immunpräzipitation (IP), CO-IP- und andere Experimente verwendet werden. Ripa-Rissflüssigkeit hat viele Formulierungen, je nach dem Risswirkung, der hauptsächlich in stark geteilt ist, mittel- und schwache drei Arten. Dieses Produkt ist eine starke Rissflüssigkeit von Ripa. Seine Hauptkomponenten umfassen 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 150 mm NaCl, 1 mM EDTA-2NA, 1% Triton X-100, 1% iger Natriumdooxycholsäure und 0,1% SDS.Dieses Produkt ist für tierisches oder pflanzliches Gewebe geeignet und Zellproben können auch für Pilz- oder Bakterienproben verwendet werden.

Komponente

G2002-30ML.

G2002-100ML.

RIPA LYSE-Puffer (stark)

30 ml.

100 ml.

Produktverwendung.


Verwendungszweck:

Proteaseinhibitor ist vorgesehen. Das Ripa Lysat (stark) sollte vor der Verwendung mit Protease-Inhibitoren hinzugefügt werden. G2006, G2007, G2008 usw. werden empfohlen, den Proteinabbau zu verhindern. Das RIPA Lysat (stark), das in der folgenden Nutzung erwähnt wird, bedeutet, dass Proteaseinhibitoren zugegeben wurden.

Für Gewebeproben:

1. Die Gewebeblöcke wurden mit vorgekühlten PBS (empfohlen G4202) gewaschen, um Blutflecken zu entfernen, und schneiden dann in kleine Stücke ein und platziert in den Homogenisator.

2. Fügen Sie 10x-Gewebevolumen von RIPA Lyse-Puffer (stark) und Homogenat bei niedriger Temperatur hinzu (es wird empfohlen, ein Hochgeschwindigkeits-Gewebeschleifinstrument KZ-III-F und KZ-III-FP zu verwenden, das unabhängig von serviceBio entwickelt und hergestellt wird ). HINWEIS: Die Menge an RIPA Lysat (stark) kann in einem Verhältnis von ungefähr 50 mg Gewebe auf 1 ml Lysat zugegeben werden. Wenn der Gehalt an Gewebeprotein niedrig ist, kann die Dosierung von Lysat reduziert werden, um die Proteinkonzentration in der Roh-Extraktlösung zu erhöhen.

3. Übertragen Sie das Homogenat auf ein 1,5 ml-Zentrifugenröhrchen und oszillieren. Eisbad 30 min, während der die Pipette wiederholt geblasen wurde, um die vollständige Lyse von Gewebezellen sicherzustellen;

4. Für 12000G-Proben sollte es 5 min zentrifugiert und den Überstand sammeln, der die Gesamtproteinlösung ist.

Für haftende Proben:

1. Waschen Sie die Zellen 2-3 Mal mit PBS und löschen Sie die restliche Flüssigkeit zum letzten Mal gründlich.

2. Gießen Sie RIPA Lysat (stark) in die Zellkulturplatte und den Kolben gemäß dem Verhältnis von 250 μl-Zelllysat pro Vertiefung der 6-Well-Platte, schütteln Sie die Kulturplatte und den Kolben wiederholt, und machen Sie das Lysat vollständig mit Zellen für 3- 5 Minuten.

3. Kratzen Sie die Zellen mit einem Zellspatel ab und sammeln Sie sich in ein Zentrifugenröhrchen.

4. Zentrifugierung bei 12000 g für 5 Minuten und sammeln Sie den Überstand, der die Gesamtproteinlösung ist.

Für Suspensionszelle:

1. Waschen Sie die Zellen 2-3 Mal mit PBS und löschen Sie die restliche Flüssigkeit zum letzten Mal gründlich.

2. Gießen Sie RIPA Lysat (stark) in die Zellkulturplatte und den Kolben gemäß dem Verhältnis von 250 μl-Zelllysat pro Vertiefung der 6-Well-Platte, schütteln Sie die Kulturplatte und den Kolben wiederholt, und machen Sie das Lysat vollständig mit Zellen für 3- 5 Minuten.

3. Kratzen Sie die Zellen mit einem Zellspatel ab und sammeln Sie sich in ein Zentrifugenröhrchen.

4. Zentrifugierung bei 12000 g für 5 Minuten und sammeln Sie den Überstand, der die Gesamtproteinlösung ist.



Anmerkungen:

1. Dicke kann während des Gewebe- oder Zelllyse auftreten. Der Pipettor kann durch das Wirbelinstrument wiederholt geblasen oder oszilliert werden, bis es flüssig ist. Wenn es dicker ist, können Sie eine geeignete Menge an Rissflüssigkeit hinzufügen.

2. Dieses Reagenz enthält keine Proteaseinhibitoren. Bitte bereiten Sie Ihre eigenen Protease-Inhibitoren vor und fügen Sie sie vor der Verwendung hinzu. G2006, G2007, G2008 und andere verwandte Protease-Inhibitoren unseres Unternehmens werden empfohlen.

3. Bitte tragen Sie während des Betriebs einen Laborkittel- und Einweghandschuhen.

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