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Anteil an:

G2038-100ml 100ml IP-Lysepuffer für Immunsol-Niederschläge

Spezialisierung:100ml
Anwendung:Lyse-Zellen oder Gewebe unter nicht denaturierenden Bedingungen zur Herstellung von Proteinproben.
Transport und Lagerung:Nasser Eisbeuteltransporte; bei -20 speichern, zwar 12 Monate.
Ml:
Verfügbarkeitsstatus:
  • G2038-100ML.
  • Servicebio

Produktbeschreibung

Überblick

IP-Lysat ist ein Lysat, das verwendet wird, um Zellen oder Gewebe zu lyse, um Proteinproben unter nicht denaturierenden Bedingungen vorzubereiten. Proteinproben, die durch Spaltung von Geweben oder Zellen mit diesem Lysat erhalten werden, können in der Seite, dem Western Blot, immunisch, immunisch, IP), CO-IP, Chip (Chromatin-Immunoppration), ELISA und anderen Experimenten verwendet werden.

Die Hauptzutaten dieses Produkts sind 25 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 1 mm EDTA, 1% NP-40 und 5% Triton X-100. Es kann auf tierische oder pflanzliche Gewebe- und Zellproben angewendet werden, und es kann auch für Pilz- oder Bakterienproben verwendet werden.


PRoduktname

Cbei. Nein.

STätigkeit

IP-Lyse-Puffer

G2038-100ML.

100 ml.

Produktverwendung.

Komponente

G2038-10ML.

IP-Lyse-Puffer

100 ml.

Verwendungszweck:

Proteaseinhibitoren sind vorgesehen. Das IP-Lysat sollte vor der Verwendung mit Protease-Inhibitoren hinzugefügt werden. G2006, G2007, G2008 usw. werden empfohlen, den Proteinabbau zu verhindern. Das in der folgende Nutzung erwähnte IP-Lysat bedeutet, dass Proteaseinhibitoren hinzugefügt wurden.


Für Gewebeproben:

1. Die Gewebeblöcke wurden mit vorgekühlten PBS (empfohlen G4202) gewaschen, um Blutflecken zu entfernen, und schneiden dann in kleine Stücke ein und platziert in den Homogenisator.

2. Fügen Sie 10x-Gewebevolumen von IP-Lyse-Puffer und Homogenat bei niedriger Temperatur hinzu (es wird empfohlen, ein Hochgeschwindigkeits-Gewebeschleifinstrument KZ-III-F und KZ-III-FP zu verwenden, das unabhängig von servicebio entwickelt und hergestellt wird). HINWEIS: Die Menge an IP-Lysat kann in einem Verhältnis von ungefähr 50 mg Gewebe auf 1 ml Lysat zugegeben werden. Wenn der Gehalt an Gewebeprotein niedrig ist, kann die Dosierung von Lysat reduziert werden, um die Proteinkonzentration in der Roh-Extraktlösung zu erhöhen.

3. Übertragen Sie das Homogenat auf ein 1,5 ml-Zentrifugenröhrchen und oszillieren. Eisbad 30 min, während der die Pipette wiederholt geblasen wurde, um die vollständige Lyse von Gewebezellen bei jedem 10min;

4. Für 12000G-Proben sollte es 5 min zentrifugiert und den Überstand sammeln, der die Gesamtproteinlösung ist.

Für haftende Proben:

1. Waschen Sie die Zellen 2-3 Mal mit PBS und löschen Sie die restliche Flüssigkeit zum letzten Mal gründlich.

Gießen Sie IP-Lysat in die Zellkulturplatte und den Kolben gemäß dem Verhältnis von 250 μl-Zelllysat pro Vertiefung der 6-Well-Platte, schütteln Sie die Kulturplatte und den Kolben wiederholt, und machen Sie das Lysat vollständig mit Zellen für 3-5 Minuten.

3. Kratzen Sie die Zellen mit einem Zellspatel ab und sammeln Sie sich in ein Zentrifugenröhrchen.

4. Zentrifugierung bei 12000 g für 5 Minuten und sammeln Sie den Überstand, der die Gesamtproteinlösung ist.

Für Suspensionszelle:

1. Waschen Sie die Zellen 2-3 Mal mit PBS und löschen Sie die restliche Flüssigkeit zum letzten Mal gründlich.

Gießen Sie IP-Lysat in die Zellkulturplatte und den Kolben gemäß dem Verhältnis von 250 μl-Zelllysat pro Vertiefung der 6-Well-Platte, schütteln Sie die Kulturplatte und den Kolben wiederholt, und machen Sie das Lysat vollständig mit Zellen für 3-5 Minuten.

3. Kratzen Sie die Zellen mit einem Zellspatel ab und sammeln Sie sich in ein Zentrifugenröhrchen.

4. Zentrifugierung bei 12000 g für 5 Minuten und sammeln Sie den Überstand, der die Gesamtproteinlösung ist.

Foder Bakterien- oder Pilzproben

Es wurden 1,1 ml bakterielle Suspension genommen, der Überstand wurde durch Zentrifugation entfernt, und die Flüssigkeit wurde einmal mit PBS gewaschen, um die Flüssigkeit vollständig zu entfernen.Vortex, um die Bakterien so weit wie möglich zu dispergieren.

2.Add 100-200 μl IP Lysat, Wirbel sanft, um die Bakterien und Lysat gut zu mischen.

3.ice-Bad für 10 Minuten, während der die Pipette wiederholt alle 2 Minuten wiederholt geblasen wurde, um eine vollständige Lyse der Bakterien zu gewährleisten.

4,12000g wurden 5 min zentrifugiert, und der Überstand wurde gesammelt, was die gesamte Proteinlösung war.




Anmerkungen:

1. Dicke kann während des Gewebe- oder Zelllyse auftreten. Der Pipettor kann durch das Wirbelinstrument wiederholt geblasen oder oszilliert werden, bis es flüssig ist. Wenn es dicker ist, können Sie eine geeignete Menge an Rissflüssigkeit hinzufügen.

2. Dieses Reagenz enthält keine Proteaseinhibitoren. Bitte bereiten Sie Ihre eigenen Protease-Inhibitoren vor und fügen Sie sie vor der Verwendung hinzu. G2006, G2007, G2008 und andere verwandte Protease-Inhibitoren unseres Unternehmens werden empfohlen.

Die von der Pyrolyse dieses Produkts erhaltene Gesamtproteinlösung ist mit unserem BCA-Protein-quantitativen Erkennungskit (G2026) kompatibel.

4.Bitte tragen Sie während des Betriebs einen Labormantel und einweghandschuhen.


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