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G3411-2000U Rekombinanter Sumoprotease mit ULP1 Sein-Tag

Spezifikation:2000UL.
Verwendungszweck:Entfernen Sie das sumo markierte Protein aus Fusionsproteinen.
Lagerung und Transport:Transport mit nassem Eis; Laden bei -20, 12 Monate gültig.
u:
Verfügbarkeitsstatus:
  • G3411-2000U.
  • Servicebio

Produktbeschreibung

Überblick

Die rekombinante Sumo-Protease (kleine Ubiquitin-Modifikations-Protease) ist eine üblicherweise verwendete UBL-spezifische Protease (UBL-spezifische Protease 1, Ubiquitin-ähnliche proteinspezifische Protease 1 (ULP1) kann die Tertiärstruktur von Sumo (kleiner Ubiquitin-ähnliches erkennen) erkennen Modifikator) Protein mit hoher Spezifität. Hydrolyse der postschlangen-GLY-Peptidbindung in dem X-Gly-Gly-X (außer PRO) -Peptid an dem Carboxy-Anschluss des Sumo-Proteins, so dass das Zielprotein nach der Spaltung der Fusion freigesetzt wurde Protein durch diese Protease enthält keine überschüssigen Aminosäuren. Der optimale pH-Wert und die Temperatur für die Sumo-Protease-Verdauung betrug 8,0 und 30 ℃. Es hat eine gute Stabilität und hohe Enzymaktivität im pH-Bereich 6,0-10,0, Temperaturbereich 2-30 ℃, ionische Festigkeit Reichweite 0-400 mm NACL.IN-Praxis, um die Struktur und die biologische Aktivität des Zielproteins so weit wie möglich zu erhalten, wird empfohlen, die rekombinante Sumo-Protease-Verdauung bei 4 ℃ über Nacht zu verwenden, und gleichzeitig das Hinzufügen von angemessenen konzentrieren auf DTT (0,5-2 mm) in das Verdauungssystem kann die Verdaueffizienz erheblich verbessern.

Anwendung: Es wird üblicherweise zum Entfernen des Sumo-markierten Proteins aus Fusionsproteinen verwendet. Die Protease selbst trägt das Seine Etikett und bindet an die Nickel-Säule.

Quelle: Saccharomyces cerevisiae Cystein-Protease, rekombinanter Ausdruck von Escherichia coli, mit seinem Etikett.

Enzymaktivitätsdefinition: Eine Einheit der Enzymaktivität kann verwendet werden, um mehr als 85% von 2 & mgr; g Substrat (mit Sumo-markiertem Protein) innerhalb von 1 h bei 30 ° C, PH8.0, zu schneiden.

Inaktivierung oder Inhibierung: Imidazol, höher als 150 mm, beeinflusst die Verdauungseffizienz rekombinanter Sumoprotease

Reinheit und Konzentration: SDS-PAGE-Testreinheit ≥95%, 10 U / μl.

Rekombinante Sumo-Protease-Speicherlösung: 25 mm Tris-HCl, pH 8,0,0,1% NP-40,250 mm NACL, 500 μm dtt, 50% (v / v) Glycerin.

10 × Sumo-Puffer + Salz: 500 mm Tris-HCl, pH 8,0,2% NP-40,1,5 m NaCl, 10 mm DTT

10 × Sumo-Puffer - Salz: 500 mm Tris-HCl, pH 8,0,2% NP-40,10 mm DTT.


Komponentennummer

Komponente

G3411-2000U.

G3411-1.

Rekombinante Sumoprotease (SEIN-TAG) (10 U / μl)

200 μl.

G3411-2.

10 × Sumo-Puffer + Salz

1 ml

G3411-3.

10 × Sumo-Puffer - Salz

1 ml

G3411-4.

Kontrollprotein

100 μl.

Produktverwendung.


1.Portenase-Verdauungssystemempfehlung

Komponente

Volumen

10 × Sumo-Puffer +/- Salz

5 μl.

Interesse Protein.

20 μg

Rekombinante TEV-Protease (sein-Tag) (10 U / μl)

1 μl.

ddh.2O

Bis 50 μl.

Das Reaktionssystem wurde bei 4 ℃ zur Übernachtungsreaktion oder 16h angeordnet;

3. 10 μl-Probe des Verdauungsprodukts wurde für die SDS-PAGE-Erkennung genommen, um den Betrag der Verdauungs- und Reaktionsbedingungen zu bewerten.


Anmerkungen


1. Enzymprodukte sollten vor der Verwendung in einem Eiskasten oder Eisbad platziert werden. Nach der Verwendung sollten sie sofort bei -20 ℃ gespeichert werden. Es wird ein separater Speicher empfohlen

2. Tragen Sie für Ihre Sicherheit und Gesundheit einen Labormantel und Einweghandschuhe, um zu arbeiten.


Firmeninformation

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