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Immunhistochemie Kit Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper für IHC Western Blot

Verfügbarkeitsstatus:
  • G1215-200T.

Produktbeschreibung

Produkteinführung:

Dieses Kit ist ein Zwei-Sensitivität-Zweistufen-Immunhistochemie-Kit, das für die anschließende Farbentwicklung von Kaninchen-abgeleiteten Primärantikörpern geeignet ist. Das Kit enthält Meerrettichperoxidase HRP-konjugiertes Ziegen Anti-Rabbit IgG. Dieses Produkt eignet sich für Kaninchen-abgeleitete Primärantikörper. In IHC- und Western-Blot-Experimenten sind HRP-markierte Ziegen-Anti-Kaninchen sekundäre Antikörper gleich wie Kaninchen-abgeleitete Primärantikörper. Antikörper (reagiert mit dem Antigen zuerst) Bindet und reagiert dann mit DAB. DAB ist ein Substrat von Meerrettichperoxidase (HRP). Unter der Katalyse von HRP erzeugt DAB braune Ausfällungen, um eine Signalverstärkung und Farbentwicklung zu erreichen.

Packungsinhalt:

Produkt Artikel-Nr.

Produktname

Spezifikation

G1215-200T.

Immunhistochemie-Kit.

200t.

Lagerbedingungen: Nasseistransport; Bewahren Sie den sekundären Antikörper bei -20 ° C auf, und die DAB-Verdünnung und 50 × DAB-Lagerlösungsspeicher bei 4 ° C; gültig für 12 Monate.

Komponente:

Komponentennummer

Komponente

G1215-200T.

G1215-1.

DAB-Verdünnungsmittel

12,5 ml.

G1215-2.

50 × DAB-Kit

250 μl.

G1215-3.

HRP-markierte Ziege Anti-Rabbit sekundärer Antikörper

100 μl.

Handbuch verwenden

1

Schritt

1. Bringen Sie Ihre eigene PBS (empfohlen G4202, G022), Kernerminister-Reagens (empfohlene Hämatoxylin-Färbungslösung G1004, Hämatoxylin-Differenzierungslösung G1039, Hämatoxylin, die blaue Lösung G1040), Gradientalkohol, Xylol, Montagetabletten usw. zurückkehren.

2. Bereiten Sie die Arbeitslösung des sekundären Antikörpers vor: Verdünnen Sie den sekundären Antikörper mit HRP-markierten Anti-Kaninchen mit PBST (pH 7.2-7.4) mit einem Verhältnis von 1: 200, um die Arbeitslösung des sekundären Antikörpers zu erhalten. Zur sofortigen Verwendung vorbereitet, verwenden Sie innerhalb von 48 Stunden.

Bereiten Sie die Farbentwicklung der DAB-Farbentwicklung vor: Fügen Sie 20 μl 50 × DAB-Aktienlösung zu jedem 1 ml DAB-Verdünnungsmittel hinzu, mischen Sie die Gute für den späteren Gebrauch gut.

Anweisungen:

Nach den routinemäßigen immunohistochemischen Verfahren sind die Gewebeabschnitte vor dem Deparaffiniert, antigen Abrufen, blockiert und mit dem primären Antikörper inkubiert und dann dreimal mit PBS für jeweils 5 Minuten gewaschen.

2. Sekundärantikörper-Inkubation: Fügen Sie 50-100 μl der sekundären Antikörper-Arbeitslösung zu jeder Scheibe hinzu, um das Gewebe vollständig abzudecken, und inkubieren Sie 30-60 Minuten bei Raumtemperatur. Dreimal mit PBS jeweils 5 Minuten waschen.

3. DAB-Farbentwicklung: Fügen Sie 50-100 μl DAB-Arbeitslösung zu jeder Scheibe hinzu, inkubieren Sie mehrere Minuten bei Raumtemperatur, beobachten Sie unter dem Mikroskop, um die Farbentwicklung auf den erwarteten Effekt zu steuern, und waschen Sie sich sofort mit Wasser, um das zu stoppen Farbentwicklung.

4. (optional) Erfüllende Zellkerne: Die Abschnitte werden mit Hämatoxylin-Färbungslösung für 3-5 min befleckt und dann mit Leitungswasser gewaschen; nach rascher Differenzierung mit Hämatoxylin-Differenzierungslösung für 3-5 s für 3-5 s, mit Leitungswasser gewaschen; Mit Leitungswasser gewaschen oder mit Hämatoxylinlösung 3-5 s in Blau zurückgebracht.

5.Mahlen: Die Scheiben sind durch Gradientalkohol gemäß den üblichen Schritten dehydratisiert, durch Xylol transportiert, und die Folien sind mit neutralem Kaugummi montiert.

Vorsichtsmaßnahmen

1. Wenn der Hintergrund während der immunhistochemischen Farbentwicklung zu dunkel ist, sollten Sie die Waschzeit erwägen, eine geeignete Blockierlösung zum Blockieren, inaktivieren endogener Katalase, verkürzen Sie die Farbentwicklungszeit und verringern Sie die Konzentration des sekundären Antikörpers. Wenn keine Farbentwicklung oder die Farbentwicklung zu licht ist, können Sie die Konzentration des primären Antikörpers und den sekundären Antikörper angemessen erhöhen, um die Farbentwicklungszeit zu erweitern, und prüfen Sie dann, ob der sekundäre Antikörper normalerweise entwickelt ist.

2. DAB ist schädlich für den menschlichen Körper, bitte seien Sie vorsichtig, wenn Sie damit umgehen, und achten Sie darauf, direkten Kontakt mit dem menschlichen Körper oder den Einatmen des Körpers zu vermeiden.

G1215-200TQ.

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