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MTT-Erkennungskit 200T MTT-Erkennungskit

Volumen: 200t.

Verfügbarkeitsstatus:
  • G4101-200T.
  • Servicebio

Produktbeschreibung

Produktinformation

Produktname

Katze. Nein.

Spezifikation

MTT-Erkennungskit.

G4101-200T.

200t.

G4101-1000T.

1000t.

Produkteinführung:

Dieses Produkt-MTT-Erkennungsset wird häufig in der Zellproliferations- und Aktivitätsbestimmung sowie in der Erkennung von Medikamenten zu Cytotoxizität eingesetzt. Der vollständige Name von MTT ist 3- (4,5-Dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2-h-tetrazoliumbromid, und der chinesische Name ist Thiazolblau. Das Erkennungsprinzip besteht darin, dass die Succinat-Dehydrogenase in der Mitochondrien von lebenden Zellen das exogene Substrat MTT in wasserunlöslichem blau-lila-Formazan (Formazan) reduzieren und in den Zellen ablagern, während tote Zellen keine solche Funktion haben. Verwenden Sie dann Dimethylsulfoxid (DMSO), um die Formazan-Ablagerungen in den Zellen aufzulösen, und messen Sie den Lichtabsorptionswert bei 490 nm oder 570 nm mit einem Mikroplattenleser. Innerhalb eines bestimmten Bereichs an Zellnummern ist der Betrag der Formazan-Formation die Anzahl der lebenden Zellen direkt proportional. Gemäß dem gemessenen Absorptionswert (OD-Wert) kann die Anzahl der lebenden Zellen beurteilt werden. Je größer der OD-Wert ist, desto mehr die Anzahl der lebenden Zellen und der stärkere der Zellaktivität (wenn die Drogentoxizität gemessen wird, bedeutet, dass die Arzneimitteltoxizität geringer ist). Bei Verwendung dieses Kits zur Erkennung der Zelllebensfähigkeit muss der Überstand nach der Reaktion angesaugt werden, sodass er nicht zur Erfassung von suspendierenden Zellen verwendet werden kann. Wenn Sie suspendierte Zellen erkennen müssen, wird empfohlen, andere Produkte unseres Unternehmens (G4103 CCK-8 Kit) zu verwenden.

Lagerung und Transport

Transport mit nassem Eis; Bei 4 ° C im Dunkeln mit einer Gültigkeitsdauer von 3 Monaten aufbewahren; oder bei -20 ° C im Dunkeln mit einer Gültigkeitsdauer von 6 Monaten lagern. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen.

Komponente

Komponentennummer

Komponente

G4101-200T.

G4101-1000T.

G4101-1.

MTT-Arbeitsflüssigkeit.

10 ml.

2 × 25 ml

G4101-2.

DMSO.

20 ml

4 × 25 ml

Produktbenutzerhandbuch

1 stück

1 stück

Betriebsschritte:

1. Anhaftende Zellbehandlung: Nachdem die Zellen an der Wand haften, fügen Sie Medikamente und Transfektion gemäß dem experimentellen Design hinzu;

2. Zellenlebensfähigkeitstest: Fügen Sie 20 μl MTT-Arbeitslösung zu jeder Vertiefung hinzu und inkubieren Sie 4 Stunden in einem Zellinkubator;

3. Entfernen Sie den Überstand: Nachdem die Inkubation abgeschlossen ist, erscheint eine kleine Menge purpurroter Kristalle an der Unterseite der Well-Platte, die unter einem 40x-Mikroskop beobachtet werden kann. Verwenden Sie eine Pipette, um die überstehende Lösung in der Brunnen sorgfältig abzusaugen (saugen Sie die violetten Kristalle nicht an der Unterseite);

4. Farbentwicklung: Fügen Sie der Well-Platte 100 μl DMSO hinzu, inkubieren Sie etwa 15 Minuten bei 37 ° C (Sie können mit Ihrem Finger auf den Boden der Platte tippen und leicht schütteln) und warten Sie, bis sich die violetten Kristalle auflösen. Wenn die violetten Kristalle kleiner und weniger sind, ist die Auflösungszeit kürzer; Wenn die violetten Kristalle größer und mehr sind, kann die Auflösungszeit entsprechend verlängert werden;

5. Erkennung: Messen Sie die Absorption bei einer Wellenlänge von 490 nm oder 570 nm. Wenn der 570-NM-Filter nicht verfügbar ist, kann ein 560-600 nm-Filter verwendet werden.

Anmerkungen:

1. DMSO verfärbt sich bei einer niedrigeren Temperatur, und es kann bei 37 ° C rekonstituiert werden, ohne die Verwendung zu beeinträchtigen.

2. Das Erkennungsprinzip dieses Kits ist auf die durch Dehydrogenase katalysierte Reaktion angewiesen. Wenn in der Probe mehr reduzierende Agenten (z. B. einigen Antioxidantien) gibt, die die Erkennung beeinträchtigen, versuchen Sie, sie zu entfernen.

3. Tragen Sie für Ihre Sicherheit und Gesundheit LAB-Mäntel und Einweghandschuhe für den Betrieb.

Das Produkt ist nur für wissenschaftliche Forschungszwecke, nicht für die klinische Diagnose!

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